■ Alta flexibilidade: rango salvaxe de volume de mostra inicial, adecuado para a extracción de mostras de gran volume nunha única reacción.
■ Alto rendemento: o método de precipitación maximiza o rendemento de ARN na mostra.
■ Uso amplo: adecuado para moitas mostras diferentes, como tecidos vexetais e animais, células cultivadas, sangue, fluído corporal, etc.
■ Funcionamento rápido: o ADN xenómico podería obterse nun prazo de 1 hora.
Tipo: Baseado en precipitacións
Mostra: Virus, bacterias, fungos, animais, tecidos vexetais, células cultivadas e fluído corporal.
Obxectivo: ARN
Tempo de operación: ~ 1 hora
Aplicacións: O reactivo universal TRNzol minimiza a contaminación de impurezas como ADN e proteínas no ARN total purificado e pode usarse directamente para varios experimentos de bioloxía molecular como Northern Blot, Dot Blot, PolyA screening, tradución in vitro, análise de protección RNase, construción de biblioteca de ADNc , RT-PCR, PCR en tempo real e secuenciación de alto rendemento.
Todos os produtos pódense personalizar para ODM / OEM. Para máis detalles,faga clic en Servizo personalizado (ODM / OEM)
Método: 30 mg de tecido hepático de rata, 100 mg de follas de arroz foron recollidas por moenda de nitróxeno líquido; 1 × 106Recolléronse por centrifugación células cultivadas con HepG2 e 700 μl de medio de cultivo Saccharomyces Cerevisiae (OD600 = 0,9). Engadíronse 1 ml de reactivo universal TRNzol de TIANGEN e os produtos relevantes do provedor L e T a cada alícuota da mostra e a extracción de ARN realizouse seguindo os protocolos proporcionados por cada provedor. O volume de elución foi de 80 μl, 50 μl, 30 μl e 30 μl para as catro mostras respectivamente. Cargáronse 3 μl do eluado por carril.
MIII: marcador TIANGEN III;
A electroforese realizouse a 6 V / cm durante 30 minutos sobre unha agarosa ao 1%.
Resultados: o reactivo universal TIANGEN TRNzol pode extraer ARN de alta pureza e boa integridade do fígado de rata, follas de arroz, células cultivadas e mostras de fermento, con alta eficiencia. A calidade do ARN é comparable ou lixeiramente superior á dos produtos L e T.
A-1 Non é suficiente a lise ou homoxeneización celular
---- Reducir o uso da mostra, aumentar a cantidade de tampón de lise, aumentar a homoxeneización e o tempo de lise.
A-2 A cantidade de mostra é demasiado grande
---- Reduce a cantidade de mostra empregada ou aumenta a cantidade de tampón de lise.
A-1 Lise ou homoxeneización celular insuficiente
---- Reducir o uso da mostra, aumentar a cantidade de tampón de lise, aumentar a homoxeneización e o tempo de lise.
A-2 A cantidade de mostra é demasiado grande
---- Consulte a capacidade máxima de procesamento.
O ARN A-3 non se elúe completamente desde a columna
---- Despois de engadir auga sen RNase, déixea uns minutos antes de centrifugar.
A-4 Etanol no eluyente
---- Despois de aclarar, centrifugue de novo e retire o amortecedor de lavado o máximo posible.
A-5 O medio de cultivo celular non se elimina completamente
---- Ao recoller células, asegúrese de eliminar o medio de cultivo o máximo posible.
A-6 As células almacenadas no almacén de ARN non se centrifugan efectivamente
---- A densidade de almacén de ARN é maior que o medio de cultivo celular medio; polo que se debería aumentar a forza centrífuga. Suxírese centrifugar a 3000x g.
A-7 Baixo contido e abundancia de ARN na mostra
---- Use unha mostra positiva para determinar se a mostra produce o baixo rendemento.
A-1 O material non é fresco
---- Os tecidos frescos deben almacenarse en nitróxeno líquido inmediatamente ou inmediatamente colocados no reactivo RNAstore para garantir o efecto de extracción.
A-2 A cantidade de mostra é demasiado grande
---- Reducir a cantidade de mostra.
A-3 RNase contamination
---- Aínda que o buffer fornecido no kit non contén RNase, é fácil contaminalo durante o proceso de extracción e debe manexarse con coidado.
A-4 Contaminación por electroforese
---- Substitúe o búfer de electroforese e asegúrese de que os consumibles e o búfer de carga están libres de contaminación por RNase.
A-5 Demasiada carga para electroforese
---- Reduce a cantidade de carga da mostra, a carga de cada pozo non debe exceder os 2 μg.
A-1 A cantidade de mostra é demasiado grande
---- Reducir a cantidade de mostra.
A-2 Algunhas mostras teñen un alto contido de ADN e pódense tratar con DNase.
---- Realice un tratamento de DNase sen RNase á solución de ARN obtida e o ARN pode usarse directamente para experimentos posteriores despois do tratamento ou pode purificarse aínda máis con kits de purificación de ARN.
Para vidros, cocidos a 150 ° C durante 4 h. Para envases de plástico, mergullados en NaOH 0,5 M durante 10 min, despois aclarados completamente con auga libre de RNase e despois esterilizados para eliminar completamente a RNase. Os reactivos ou solucións empregados no experimento, especialmente a auga, deben estar libres de RNase. Use auga sen RNase para todas as preparacións de reactivos (engade auga a unha botella de vidro limpa, engade DEPC a unha concentración final do 0,1% (V / V), axítase durante a noite e autoclave).
Dende a súa creación, a nosa fábrica está a desenvolver produtos de primeira clase mundial co cumprimento do principio
de calidade primeiro. Os nosos produtos gañaron unha excelente reputación na industria e confianza valiosa entre clientes novos e antigos ..